Assassin's Creed II é uma épica narrativa de irmandade, vingança e conspiração, ambientada na brutal Itália do Renascimento no século XV. O protagonista, Ezio Auditore da Firenze, forma uma aliança com Leonardo da Vinci e enfrenta as poderosas famílias de Florença. Sua jornada o leva pelos canais de Veneza, onde ele aprimora suas habilidades para se tornar um verdadeiro mestre assassino.